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如何測量高濃度溶液的熒光光譜？

來源：日立分析儀器（上海）有限公司 2020年12月18日 16:58

　　1.前言

　　熒光分析法可用于物質的定量和定性分析，而且靈敏度高，對于稀溶液來說，熒光強度和樣品濃度成線性關系。那么如何準確測量高濃度的溶液樣品呢？

　　圖1和圖2分別是使用10mm矩形樣品池+標準樣品池支架和10mm矩形樣品池+固體樣品支架的測定示意圖。

　　圖1 10mm矩形樣品池+標準樣品池支架

　　圖2 10mm矩形樣品池+固體樣品支架

　　從圖中可以看出，使用圖1的方式測量高濃度樣品時，激發光無法到達樣品內部，并且在液體表面更容易產生熒光，這種現象被稱為自吸收。由于樣品本身對熒光的吸收，造成更短波長處的熒光消失。如果稀釋樣品不合適，則需要選用圖2的方式測量高濃度樣品，通過使用固體樣品支架，捕捉樣品表面的熒光。

　　2.在此實驗中，我們測量了市售橄欖油和初榨橄欖油的三維熒光光譜，并比較了熒光強度。

　　樣品：不同濃度的橄欖油

　　測量附件：固體樣品支架

　　測量結果：四種樣品的三維熒光光譜

　　圖3 品牌A橄欖油的三維熒光光譜

　　圖4 品牌A初榨橄欖油的三維熒光光譜

　　圖5 品牌B橄欖油的三維熒光光譜

　　圖6 品牌B初榨橄欖油的三維熒光光譜

　　使用日立熒光分光光度計F-7100以60000nm/min的掃描速度，獲得了多個樣品的高信噪比光譜。在所有測試的橄欖油三維熒光光譜中，在兩個區域(i)、(ii)處觀察到熒光，計算(ii)/(i)的熒光強度比，可以看出，兩個品牌的初榨橄欖油與橄欖油相比，初榨橄欖油的強度比更高。

　　3.使用熒光分光光度計測量高濃度樣品溶液時，注意樣品自吸收對熒光光譜產生的影響。日立熒光分光光度計搭配固體樣品支架，以高通量測量了高濃度橄欖油的三維熒光光譜，測量結果準確。

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