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血清質量如何鑒定?

來源:上海古朵生物科技有限公司   2019年04月22日 10:25  

如何儲存和解凍血清才不會使產品質量受損?

將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過程中必須規則地搖晃均勻。

長時間儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此,推薦在-20℃以下儲存血清,并避免反復凍融。

我們建議血清應保存在-2O℃。若存放于4℃時,請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內,再放回冷凍。

2、血清中包含絮狀沉淀,它們是什么,怎么處理?

沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性,不會影響產品性質。要除去沉淀,離心血清(400g,1-2分鐘)或者簡單的讓其沉淀在瓶子底部,將血清小心的 轉移到另一個無菌瓶里(一般不建議采用過濾的方法除去沉淀,因為沉淀會堵塞濾膜而無法過濾)。大多情況輕輕搖動沉淀并加熱至37℃就會再溶解。所以,使用 產品時要搖動并加熱血清至37℃,沉淀會自然消失。

3、如何避免血清中產生沉淀?

按如下操作可避免沉淀的產生:

(1)解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發生。

(2)血清分裝凍存時,須規則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。

(3)勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝結而發生沉淀。

(4)勿將血清置于37℃太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中許多較不穩定的成份也會因此受到破壞,從而影響血清的品質。

(5)血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。

(6)若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。

4、培養基中添加了血清和抗生素后,可長期保存嗎?

一旦您在新鮮培養基中添加了血清和抗生素時,您應該在兩到三周內使用它。因為一些抗生素和血清中的基本成分在解凍后就開始降解。

5、為什么要熱滅活血清?

加熱可以滅活補體系統。激活的補體參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學研究,培養ES細胞、平滑肌細胞時,推薦使用熱滅活血清。

6、有必要做熱滅活嗎?

實驗顯示,經過正確處理的熱滅活血清,對大多數的細胞而言是不需要的。經此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,或*沒有任何作用,甚至通常因為高 溫處理影響了血清的質量,而造成細胞生長速率的降低。而經過熱處理的血清,沉淀物的形成會顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是小黑點,常常會 讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環境中,又會使此沉淀物更增多,使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。

若非必須,可以不需要做熱處理這一步。不但節省時間,更確保血清的質量!

在此,我們解析血清的質量標準:

1.牛血清必須來自有文件證明無牛海綿狀腦病的牛群或國家。并應具備適當的監測系統。

2.證明所用牛血清中不含對所生產疫苗病毒的抑制物。

3.有些國家還要求牛血清來自未用過反芻動物蛋白飼料的牛群。

4.無細菌、霉菌、支原體和病毒的污染,有些國家要求無細菌噬菌體污染。

5.對細胞有良好的支持繁殖作用。

6.血清要通過濾膜過濾除菌,保證無菌。

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