HiCynth™三糖鐵瓊脂基于葡萄糖、乳糖和蔗糖發酵和硫化氫生產，用于鑒定革蘭氏陰性腸桿菌。HiCynth™三糖鐵瓊脂（微生物培養基）

HiCynth™三糖鐵瓊脂（微生物培養基）

HiCynth™三糖鐵瓊脂基于葡萄糖、乳糖和蔗糖發酵和硫化氫生產，用于鑒定革蘭氏陰性腸桿菌。

HiCynth™三糖鐵瓊脂（微生物培養基）

組成：

成分                       g/L

HiCynth™蛋白胨1號        16.000

HiCynth™蛋白胨6號         3.000

乳糖                       10.000

蔗糖                       10.000

葡萄糖                     1.000

氯化鈉                     4.000

*                 3.000

硫酸鐵                     0.200

枸椽酸鐵銨                 0.300

*                     2.000

DL-蛋氨酸                  2.000

*                     1.000

酚紅                       0.024

瓊脂                       12.000

zui終pH值（25℃）         7.4±0.2

HiCynth™三糖鐵瓊脂（微生物培養基）

使用指導：

在1000ml蒸餾水中重懸64.52g培養基干粉。必要時加熱以*溶解。混勻并轉入試管中。高壓滅菌（15磅121℃，15分鐘）。使培養基斜面定型，并保留拖尾1英寸長。

說明：要得到更好結果，培養基可10磅115℃，15分鐘滅菌。

原理和說明：

三糖糖瓊脂zui初由Sulkin和Willett¹提出，并由Hajna²修改，用于鑒定腸桿菌。該培養基符合APHA的建議，用于檢查肉類和食物產品³，用于檢查牛奶和乳制品⁴和微生物限度試驗，以確認其存在沙門氏菌^5,6和鑒定革蘭氏陰性桿菌^6,7。HiCynth™三糖鐵瓊脂是采用不含動物和植物蛋白胨的化學限定成分，以避免動物蛋白胨帶來的牛海綿狀腦病（BSE）/傳染性海綿狀腦病（TSE）風險。

HiCynth™蛋白胨1號和HiCynth™蛋白胨6號提供必要的氮源和碳源的化合物、硫、微量元素和維生素B復合物，氯化鈉維持培養基的滲透壓平衡。乳糖，蔗糖和葡萄糖是可發酵的碳水化合物。*和亞鐵離子形成H2S指示劑系統。酚紅是pH指示劑。發酵葡萄糖的生物體產生各種酸，將培養基的顏色從紅色變為黃色。管尾部（發酵）比斜面上（呼吸）有更多的酸釋放。生長的細菌由于蛋白胨的氧化脫羧，產生堿性產物。這些堿性產物中和了在尾部產生的大量的酸。因此，孵育后的堿性（紅色）斜面和酸性（黃色）尾部的出現，表明生物體對葡萄糖發酵，但不能發酵乳糖和/或蔗糖。除了葡萄糖之外，發酵乳糖或蔗糖（或兩者）的細菌，產生大量的酸，而不會使該區域的pH反轉，因此細菌表現出斜面產酸和尾部產酸。氣體產生（CO2）是通過積聚的氣體逃逸時，在培養基中存在裂紋或氣泡來檢測的。當通過幾種細菌將硫代硫酸鹽還原成硫化氫，并且硫化氫與鐵鹽中的鐵離子結合生成不溶性黑色沉淀物硫化亞鐵。硫酸氫鈉的還原僅在酸性環境中進行。黑色只在試管尾部出現。HiCynth™三糖鐵瓊脂可和尿素瓊脂/肉湯平行使用，用于區分沙門氏菌和變形桿菌。反應總結如下：

堿性斜面/酸性尾部——只有葡萄糖發酵

酸性斜面/酸性尾部——葡萄糖和蔗糖發酵或葡萄糖和乳糖發酵或所有三種糖葡萄糖、乳糖和蔗糖發酵。

氣泡或裂縫存在——氣體生產

黑色沉淀物存在——H2S氣體生產

腸桿菌和產生H2S的沙門氏菌的一些成員在Hicynth™三糖鐵瓊脂上可能不是H2S陽性， 一些細菌可能在Kligler Iron HiCynth™瓊脂上顯示H2S生成，但不能在HiCynth™三糖鐵瓊脂上顯示H2S生產。 這可能是因為在HiCynth™三糖鐵瓊脂中使用蔗糖，其結果抑制了細菌H2S產生的酶途徑。

質量控制

外觀

淡黃色至粉色均一松散粉末

成膠性

結實，相當于1.2%瓊脂糖凝膠

制備的培養基顏色和透明度

粉紅色透明溶液至輕微不透明凝膠，在試管內形成斜面

pH值（25℃）

7.20~7.60

培養反應

35℃-37℃孵育18-24小時

儲存和保質期

30℃以下密閉保存。配好后的培養基2-8℃保存。在標簽上的截止日期前使用。

參考文獻：

1. Sulkin E.S. and Willett J.C., 1940, J. Lab. Clin. Med., 25:649.

2. Hajna A.A., 1945, J. Bacteriol, 49:516.

3. Downes F. P. and Ito K., (Eds.), 2001, Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods, 4th Ed., APHA, Washington, D.C. 4. Wehr H. M. and Frank J. H., 2004, Standard Methods for the Microbiological Examination of Dairy Products, 17th Ed., APHA Inc., Washington, D.C.

5. Finegold S. M. and Baron E. J., 1986, Bailey and Scotts Diagnostic Microbiology, 7th Ed., The C.V. Mosby Co., St. Louis.

6. Eaton A. D., Clesceri L. S. and Greenberg A. W., (Eds.), 2012, Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 22nd Ed., APHA, Washington, D.C.

7. MacFaddin J., 1985, Media for Isolation-C*tion-Identification-Maintenance of Medical Bacteria, Vol. 1, Williams and Wilkins, Baltimore