HiCynth™李斯特菌鑒別基礎微生物培養基*用于選擇性鑒別分離單核細胞增生性李斯特菌。使用指導:在460ml蒸餾水中重懸36.02g培養基干粉。必要時加熱以*溶解。
HiCynth™李斯特菌鑒別基礎微生物培養基
HiCynth™李斯特菌鑒別培養基*用于選擇性鑒別分離單核細胞增生性李斯特菌。
組成:
成分 g/L
HiCynth™蛋白胨1號 24.000
HiCynth™蛋白胨5號 10.000
丙酮酸鈉 2.000
葡萄糖 2.000
甘油磷酸鎂 1.000
* 0.500
氯化鈉 5.000
氯化鋰 10.000
無水* 2.500
顯色底物 0.050
瓊脂 15.000
zui終pH(25℃) 7.2±0.2
HiCynth™李斯特菌鑒別基礎微生物培養基
使用指導:
在460ml蒸餾水中重懸36.02g培養基干粉。必要時加熱以*溶解。高壓滅菌(15磅121℃,15分鐘)。冷卻至45-50℃。無菌加入1管無菌的李斯特菌增菌添加劑I(FD214)和李斯特菌選擇性水化添加劑I(FD212)和添加劑II(FD213)。混勻,倒入無菌培養皿中。
警告:氯化鋰有害。避免身體接觸和吸入蒸氣。一旦與皮膚接觸,需用大量水沖洗。
HiCynth™李斯特菌鑒別基礎微生物培養基
原理和說明:
單核細胞增多性李斯特菌是一種革蘭氏陽性的食源性人類病原體。孕婦的嚴重感染,可能zui終導致流產、死胎、新生兒李斯特菌病和腦膜炎或成人和青少年的原發性菌血癥。綿羊李斯特桿菌對人類的致病性不確定。由于單核細胞增生性李斯特菌和英諾克李斯特菌具有相似的生物化學性質,它們不能在傳統培養基(PALCAM,Oxford)上區分。 李斯特菌鑒別培養基由Ottoviani和Agosti1,2制備,用于從食品和動物飼料中選擇性鑒別分離單核細胞增生性李斯特菌,被ISO委員會采用3。HiCynth™李斯特菌鑒別培養基用化學限定的蛋白胨*取代了動物蛋白胨或植物蛋白胨,避免了與動物蛋白胨相關的海綿狀腦病風險。
HiCynth™蛋白胨和HiCynth™蛋白胨5號提供氮源和碳源物質、長鏈氨基酸、維生素和必需的生長營養素。丙酮酸鈉支持良好的生長。葡萄糖是可發酵的碳水化合物。氯化鈉保持滲透平衡。磷酸鹽起緩沖作用。氯化鋰和添加的選擇性添加劑(FD212和FD213)抑制伴隨生長的微生物群落,卻允許李斯特菌的生長。
李斯特菌水解顯色底物,產生綠色菌落。單核細胞增多性李斯特菌和來自其他李斯特菌的鑒別是基于磷脂酰肌醇特異性的磷脂酶C活性。磷脂酶C水解添加到培養基中的純化的底物(FD214),導致單核細胞增生李斯特菌菌落周圍產生出不透明的光暈。
質量控制
外觀
乳黃色均一松散粉末
成膠性
結實,相當于1.5%的瓊脂糖凝膠
制備的培養基顏色和透明度
平皿上為淺琥珀色透明凝膠
pH值(25℃)
7.00-7.40
培養反應
添加單核細胞增生性李斯特菌選擇性添加劑I(FD212)、單核細胞增生性李斯特菌選擇性添加劑II和單核細胞增生性李斯特菌增菌添加劑(FD214)后,在35℃-37℃培養24-48小時。
微生物 | 接種量(CFU) | 生長狀況 | 回收率 | 菌落顏色 | 磷脂酰肌醇特異性的磷脂酶C活性 |
白色念珠菌ATCC 10231 | >=10³ | 抑制 | 0% | ||
糞腸球菌ATCC 29212 | >=10³ | 抑制 | 0% | ||
大腸桿菌ATCC 25922 | >=10³ | 抑制 | 0% | ||
英諾克李斯特菌ATCC 33090 | 50-100 | 豐饒生長 | >=50% | 藍綠色 | 陰性 |
格氏李斯特菌ATCC19120 | 50-100 | 豐饒生長 | >=50% | 藍綠色 | 陰性 |
綿羊李斯特菌ATCC19119 | 50-100 | 豐饒生長 | >=50% | 藍綠色 | 陽性,菌落周圍有不透明光暈 |
單核細胞增生性李斯特菌ATCC 19112 | 50-100 | 豐饒生長 | >=50% | 藍綠色 | 陽性,菌落周圍有不透明光暈 |
西爾李斯特菌ATCC35967 | 50-100 | 豐饒生長 | >=50% | 藍綠色 | 陰性 |
威爾斯李斯特菌ATCC 43549 | 50-100 | 豐饒生長 | >=50% | 藍綠色 | 陰性 |
綠膿桿菌ATCC 27853 | >=10³ | 抑制 | 0% |
儲存和保質期
干粉保存在密閉容器中。配好后的培養基2-8℃保存。在標簽上的截止日期前使用。
參考文獻:
1. Ottaviani F., Ottaviani M., and Agosti M. (1997 a), Industrie Alimentari 36, 1-3.
2.Ottaviani F., Ottaviani M., and Agosti M. (1997 b), Quimper Froid Symposium Proceedings p. 6, A.D.R.I.A. Quimper,France, 16-18 June 1997.
3.Draft Amendment ISO 11290-2:1996/DAM
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